Kd (Constante de disociación)
La constante de disociación (Kd) mide la afinidad termodinámica de un ligando por su receptor, con independencia de cualquier acoplamiento a un efecto biológico. Corresponde a la concentración de ligando a la que el 50% de los receptores están ocupados en equilibrio. Cuanto más baja es la Kd (típicamente nanomolar o picomolar para péptidos de alta afinidad), más estable es la interacción ligando-receptor.
Formalmente, la Kd se define como el cociente de las constantes cinéticas de disociación y asociación: Kd = koff / kon. Un ligando con un kon alto (asociación rápida) y un koff bajo (disociación lenta) presenta una Kd baja y una ocupación prolongada del receptor, un fenómeno explotado en la farmacología moderna para desarrollar compuestos con una duración farmacodinámica larga a pesar de una semivida plasmática corta.
Los métodos de medición de la Kd son diversos: resonancia de plasmón superficial (SPR, técnica Biacore), calorimetría de titulación isotérmica (ITC), polarización de fluorescencia, unión de radioligando, termoforesis a microescala (MST). El SPR se ha impuesto como referencia porque proporciona simultáneamente kon, koff y Kd en tiempo real, sin marcaje del ligando. La ITC ofrece además las contribuciones entálpicas y entrópicas a la energía libre de unión, una información valiosa para el diseño racional de péptidos optimizados.
La distinción entre Kd y EC50 es un punto conceptual fundamental que a menudo se confunde. La Kd mide la afinidad bruta del receptor: con qué fuerza se une el ligando. La EC50 mide la potencia funcional: con qué eficacia el ligando activa una respuesta biológica. Para un agonista pleno en un sistema sin reserva de receptores, la Kd y la EC50 convergen. Pero en la mayoría de los sistemas fisiológicos con amplificación de la señal (cascada de segundos mensajeros, reserva de receptores), la EC50 suele ser de 10 a 100 veces más baja que la Kd: una ocupación parcial basta para producir el efecto máximo.
En la investigación de péptidos, la caracterización de la Kd permite comprender diferencias sutiles entre análogos. La semaglutida, por ejemplo, presenta una Kd sobre el receptor humano de GLP-1 en el rango picomolar, lo que refleja una unión extremadamente estable. Para los péptidos ofrecidos en lab-peptides-france.com, los datos de afinidad publicados guían la selección del compuesto más pertinente para una pregunta científica dada y permiten anticipar la duración de la ocupación del receptor en un sistema experimental.